Protitumorsko delovanje elektrokemoterapije na osteosarkom in vitro in in vivo
Osteosarkom je eden najpogostejših primarnih kostnih tumorjev, pri katerem že več kot tri desetletja ni bilo pomembnega napredka pri dolgoročnem nadzoru tumorjev. V zadnjih letih se elektrokemoterapija uspešno uporablja pri tumorjih različnih histologij, kot so melanomi, karcinomi bazalnih in ploščatoceličnih celic, adenokarcinomi in tudi kostne metastaze različnih primarnih vrst raka. Glede na trenutno stopnjo uspešnosti pri različnih histologijah tumorjev elektrokemoterapija predstavlja obetaven pristop k zdravljenju osteosarkoma. Poleg tega elektrokemoterapija s specifičnimi citotoksičnimi zdravili (kot je oksaliplatin) izzove imunogeno celično smrt, ki ima imunomodulatorne lastnosti, ter tako izboljša protitumorski odziv. V predlaganem projektu želimo raziskati učinek elektrokemoterapije z bleomicinom, cisplatinom ali oksaliplatinom na ortotopičnih tumorjih osteosarkoma pri miših. V okviru projekta bodo ovrednotili občutljivost mišje osteosarkomske celične linije po elektroporaciji z bleomicinom, cisplatinom ali oksaliplatinom. V drugem sklopu bomo vzpostavili 3D modele sferoidov, na katerih bomo prav tako preverili občutljivost teh modelov na elektrokemoterapijo z bleomicinom, cisplatinom ali oksaliplatinom. Nato bomo vzpostavili metodo nasajanja ortotopičnega osteosarkomskega tumorja in določili farmakokinetiko bleomicina, cisplatina in oksaliplatina. Z vzpostavljenim protokolom za ortotopične osteosarkomske tumorje in določeno koncentracijo citostatikov v osteosarkomih bomo ocenili učinkovitost elektrokemoterapije glede na zaostanek rasti tumorja, ki ga bomo spremljali z neinvazivnim bioluminiscenčnim slikanjem.
Pričakujemo, da bomo uspešno vzpostavili večcelične tumorske sferoide, ki bodo pripomogli k boljši translaciji učinkov terapije iz in vitro na in vivo nivoja raziskav. Predpostavljamo, da bo EKT imela protitumorski učinek na ortotopične osteosarkomske tumorje in bo povečala infiltracijo imunskih celic v primarne tumorje. Naš prispevek znanosti vključuje uspešno vzpostavitev ortotopičnih tumorjev v specifičnem mikrookolju kosti, ki je ključna za razumevanje sprememb v populaciji imunskih celic osteosarkomskih tumorjev ob zdravljenju z EKT. S tem bomo dodatno osvetlili delovanje EKT ter jo ovrednotili kot potencialno terapijo za zdravljenje kostnih osteosarkomov v kliniki.