Vloga nekroptoze pri akutni mieloični levkemiji

Akutna mieloična levkemija (AML) je najpogostejša oblika akutne levkemije pri odraslih in predstavlja fenotipsko in genetsko heterogeno skupino malignih mieloičnih neoplazem. V tem projektu bomo izločili ključne beljakovine »upstream« signalnih poti nekroptoze (TNFR1, TNFR2) in raziskali njihov vpliv na nastanek in obstojnost AML, povzročene s FLT3-ITD, AML-ETO- in MLL-ENL, na mišjem modelu. Uporabili bomo model presaditve mišjega kostnega mozga, ki je še posebej primeren, ker so bile uporabljene mutacije/translokacije izolirane od bolnikov z AML in bodo tako služile kot dober model za človeške levkemije. Za opredelitev učinkov TNFR1 in TNFR2 na nastanek in napredovanje AML bodo miši divjega tipa (WT), TNFR1-, TNFR2- in TNFR1/2-deficientne miši zdravljene s 5-fluorouracilom (5-FU), ki povzroči obogatitev frakcije matičnih celic v kostnem mozgu donorske miši. Zbrane celice kostnega mozga bodo transducirane z retrovirusnimi vektorji, ki izražajo FLT3-ITD, AML-ETO- ali MLL-ENL, in nato presajene v letalno obsevane prejemne miši divjega tipa. V drugem koraku bomo s pomočjo pretočne citometrije določili učinke TNFR1 in TNFR2 na levkemične matične celice. Tako bomo lahko vzpostavili metodo presaditve kostnega mozga v Ljubljani in dodatno ovrednotili signalne poti nekroptoze pri AML.